Качественное моделирование ишемии головного мозга является одним из важных условий проведения доклинических испытаний лекарственных средств. Для создания инструмента контроля кровотока в головном мозге крысы при ишемии предложено использовать ультразвуковую допплерографию. Цель работы - оценить эффективность использования высокочастотной ультразвуковой допплерографии для верификации мозгового кровотока при ишемии мозга у крыс. Ишемия головного мозга крысы моделировалась по методике J. Koidzumi - 30-минутная филаментная окклюзия средней мозговой артрии (СМА). Животные были разделены на группы: 1) без допплерографического контроля; 2) с допплерографическим контролем. Для оценки кровотока была использована высокочастотная ультразвуковая допплерография («Минимакс-Допплер-К», датчик с частотой 25 МГц) через трепанационное окно в проекции левой СМА на всех этапах эксперимента. Для оценка величины зоны инфаркта использовалась окраска трифенилтетразолием. Для описания причин неудачных попыток окклюзии СМА проанализирован опыт проведения 352-х экспериментов по моделированию ишемии у крыс. В группе 1 в 20 % опытов либо не выявлено морфологического повреждения мозга, либо инфаркт занимал весь бассейн СМА, что свидетельствует об отсутствии реперфузии. В группе с допплерографией животные без полной окклюзии СМА либо без восстановления кровотока после ишемии, исключались из исследования. Инфаркт мозга был получен во всех опытах второй группы. В группе 1 размер инфаркта составил 13,03±1,96 %, а группе 2 - 13,39±0,69 % (p>0,05). Однако разброс значений был больше в группе 1, где не использовался контроль ультразвуковой допплерографией. Использование ультразвуковой допплерографии позволяет отобрать животных для исследования, проконтролировать степень и стабильность окклюзии во время ишемии, исключить из эксперимента животных с атипичным мозговым кровотоком, что приводит к повышению качества экспериментальной ишемии головного мозга.
Introduction. The quality control of experimental focal cerebral ischemia is one of the most important prerequisites of preclinical studies in rodents. We suggest ultrasound Doppler examination to be useful instrument for cerebral blood flow assessment during MCA occlusion in rats. The aim of our work was to test efficacy of the ultrasound Doppler examination for cerebral blood flow verification during MCA occlusion in rats. Methods. We applied focal cerebral ischemia by Koizumi. All animals were subjected to 30 minutes of MCA occlusion via filament implantation. They were divided in two groups: 1) without ultrasound Doppler examination and 2) with ultrasound Doppler examination. We performed left craniectomy for monitoring the efficacy of ischemia with the help of ultrasound dopplerography («Minimax-Doppler-К» sensor 25 MHz). Brain tissue slices were stained with 2 % triphenyl tetrazolium chloride (TTC) to assess the infarction volume. Results. 20 % of experiments in first group didn't show morphological brain lesion after TTC staining, or infarction spanned the entire MCA territory which is indicative of the lack of reperfusion. There was no significant difference in infarction size between two groups. However, the values were more heterogenous in group 1. Conclusion. By using dopplerography in experimental group we could exclude the animals with severe no-reflow. Ultrasonic dopplerography offers the opportunity of selecting animals, control occlusion extent, and occlusion stability during the ischemia, while the animals with atypical brain blood supply could be excluded. Eventually, it results in better reproducibility of experimental brain ischemia and promote animal saving.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.