microcirculationРегионарное кровообращение и микроциркуляцияRegional blood circulation and microcirculation1682-66552712-9756Academician I.P. Pavlov First St. Petersburg State Medical University10.24884/1682-6655-2019-18-3-44-52microcirculation-441Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ (КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ)ORIGINAL ARTICLES (CLINICAL INVESTIGATIONS)Динамика функциональной активности тромбоцитов после эндопротезирования аневризм брюшной аортыDynamics of platelets functional activity data in patients after infrarenal aortic aneurysm stentgraftinghttps://orcid.org/0000-0001-8652-8778СветликовА. В.SvetlikovA. V.

канд. мед. наук, доцент, зав. отделением

MD, PhD, Associate Professor, Chief of Department

asvetlikov@mail.ruХубулаваГ. Г.KhubulavaG. G.

д-р мед. наук, профессор, академик РАН, зав. кафедрой клиника хирургии (усовершенствования врачей) им. П. А. Куприянова

MD, PhD, DSc, Professor, Academician of Russian Academy of Sciences, Head Department of Surgery (Education of Doctors)

ggkh07@rambler.ruhttps://orcid.org/0000-0003-3435-5881ЕрмаковА. И.ErmakovA. I.

врач центральной клиникодиагностической лаборатории

physician analyst at the Central clinical laboratory department

Aleksey.Ermakov@szgmu.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1000-1114ГайковаяЛ. Б.GaikovayaL. B.

д-р мед. наук, зав. кафедрой биологической и общей химии, зав. центральной клиникодиагностической лабораторией

MD, PhD, Professor Department of biological and general chemistry

Larisa.Gaikovaya@szgmu.ruГуревичВ. С.GurevichV. S.

д-р мед. наук, профессор, руководитель отдела

MD, PhD, DSc, Professor, Head of Department

ater@med122.comФедеральное государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Клиническая больница № 122 имени Л. Г. Соколова» Федерального медико-биологического агентства Российской Федерации; Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Северо-Западный государственный медицинский университет имени И. И. Мечникова» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияL. G. Sokolov Clinical Hospital № 122 of the Federal Medical Biological Agency of the Russian Federation; North-Western State Medical University named after I. I. MechnikovRussian FederationФедеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования «Военномедицинская академия имени С. М. Кирова» Министерства обороны Российской ФедерацииРоссияMilitary Medical Academy named after S. M. KirovRussian FederationФедеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Северо-Западный государственный медицинский университет имени И. И. Мечникова» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияNorth-Western State Medical University named after I. I. MechnikovRussian FederationФедеральное государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Клиническая больница № 122 имени Л. Г. Соколова» Федерального медико-биологического агентства Российской Федерации; Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Северо-Западный государственный медицинский университет имени И. И. Мечникова» Министерства здравоохранения Российской Федерации; Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Санкт-Петербургский государственный университет»РоссияL. G. Sokolov Clinical Hospital № 122 of the Federal Medical Biological Agency of the Russian Federation; North-Western State Medical University named after I. I. Mechnikov; Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education «Saint-Petersburg State University»Russian Federation2019071020191834452Copyright © Светликов А.В., Хубулава Г.Г., Ермаков А.И., Гайковая Л.Б., Гуревич В.С., 20192019Светликов А.В., Хубулава Г.Г., Ермаков А.И., Гайковая Л.Б., Гуревич В.С.Svetlikov A.V., Khubulava G.G., Ermakov A.I., Gaikovaya L.B., Gurevich V.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.microcirc.ru/jour/article/view/441

Цель работы – изучение влияния эндопротезирования (ЭП) аневризм брюшной аорты (АБА) на функциональную активность тромбоцитов, выраженную экспрессии гликопротеиновых IIb/IIIa-рецепторов и в уровне экспрессии Р-селектина по сравнению с этими показателями при не требующих оперативного лечения малых аневризмах (МА) с размером до 50 мм.

Материал и методы

Материал и методы. Определение тромбоцитарной активности анализировали по изменению экспрессии гликопротеиновых (GP) IIb/IIIa-рецепторов и уровня экспрессии Р-селектина. Циркулирующие эндотелиальные клетки (ЦЭК) подсчитывали проточной цитометрией. Для анализа субпопуляций моноцитов использовали тест с реагентами CD14-FITC/ CD16-PE/ HLADR-PC5/CD45-PC7. Исследования проводили в образцах крови пациентов до ЭП, в течение 4 недель и через 18 месяцев после операции в сравнении с пациентами с МА, не требующими оперативного лечения.

Результаты

Результаты. Выявлено достоверное (р<0,05) снижение содержания Р-селектина на поверхности вне индукции АДФ у пациентов с БА брюшной аорты по сравнению с группой пациентов с малыми аневризмами (МА). Такая же статистически значимая (р=0,04) разница обнаружена и в экспрессии IIb/IIIa-рецепторов у пациентов с БА и МА. Выявлено достоверное увеличение (р=0,02) экспрессии IIb/IIIa-рецепторов у пациентов в отдаленном послеоперационном периоде. Имеется положительная корреляционная связь между маркером Р-селектина (CD62-стимулированный АДФ) и количеством ЦЭК. >< 0,05) снижение содержания Р-селектина на поверхности вне индукции АДФ у пациентов с БА брюшной аорты по сравнению с группой пациентов с малыми аневризмами (МА). Такая же статистически значимая (р=0,04) разница обнаружена и в экспрессии IIb/IIIa-рецепторов у пациентов с БА и МА. Выявлено достоверное увеличение (р=0,02) экспрессии IIb/IIIa-рецепторов у пациентов в отдаленном послеоперационном периоде. Имеется положительная корреляционная связь между маркером Р-селектина (CD62-стимулированный АДФ) и количеством ЦЭК.

Выводы

Выводы. Полученные данные указывают на взаимосвязь между тяжестью патологического процесса и степенью функциональной активности тромбоцитов у пациентов с АБА. Обнаружено влияние эндопротезирования аневризмы брюшной аорты на эти показатели и их взаимосвязь с дисфункцией эндотелия. Полученные данные создают возможности для разработки новых направлений в лечении аневризматической болезни и профилактики послеоперационных осложнений.

 

 

It is known that hemostatic, immune and autoimmune reactions can play a role in the development and progression of abdominal aortic aneurysms (AAA), including the activation of platelets and CEC However the role of those in pathogenesis of AAA remains unclear.

The aim of this study was to study the influence of EVAR on functional activity of platelets and number of circulating endothelial cells (CEC) in comparison with small abdominal aortic aneurysms – AAA (less than 5 cm)

Material and methods

Material and methods. Platelets activity has been analyzed due to the assessment of quantity of GP IIb/IIIa receptors and expression of P-selectin. CD14-FITC/CD16-PE/ HLADR-PC5/CD45-PC7 has been used to assess the monocytes activity CEC were counted by flow cytometry in blood samples of patients before EVAR, within 4 weeks and in 18 months after the operation in comparison with non-operated patients due to small diameter AAA. Markers (CD146 + CD45) were used to identify CEC.

Results

Results. The amount of Р-selectin, СD62 in patients with small aneurysms (SAAA) in comparison of aneurysms more the 5 cm (BAAA). has been increased (р<0,05). There was the statistically significant difference in amount of GP IIb/IIIa in SAAA and BAAA(р=0,04). The number of monocytes were less in SAAA Positive correlation between CEC and monocytes and between the size of aneurysms in BAAA before the operation have been revealed. We found the positive correlation between CEC number and P-selectin (CD62), in patients at early postoperative period. The significant difference (р=0,02) (GP) IIb/IIIa receptors in patients before and at late postoperative period has been found ><0,05). There was the statistically significant difference in amount of GP IIb/IIIa in SAAA and BAAA(р=0,04). The number of monocytes were less in SAAA Positive correlation between CEC and monocytes and between the size of aneurysms in BAAA before the operation have been revealed. We found the positive correlation between CEC number and P-selectin (CD62), in patients at early postoperative period. The significant difference (р=0,02) (GP) IIb/IIIa receptors in patients before and at late postoperative period has been found.

Conclusion

Conclusion. The change in the quantitative characteristics of CEC, platelets and monocytes during the growth of AAA confirms the idea about the activation of innate immunity as an important pathogenetic link in the development of this disease, closely associated with the destruction of the vascular wall and, in particular, of its endothelial lining. The obtained data partly explain the unsatisfactory long-term results of the EVAR and provide an opportunity for developing new approaches for prevention of postoperative complications and the treatment of AAA.

 

 

аневризма брюшной аортыфункциональную активность тромбоцитовР-селектингликопротеиновые (GP) IIb/IIIa-рецепторыэндопротезирование аневризмыпатогенез аневризмы брюшной аортыaneurysm of abdominal aorta (AAA)EVARcirculating endothelial cellsGP IIb/IIIa receptors and expression of P-selectin pathogenesis of AAAReferencesISLH 2008. Sydney, Coagulation / Haemostasis Workshop.ISLH 2008. Sydney, Coagulation / Haemostasis Workshop.Enjeti AK, Lincz LF, Seldon M. Detection and measurement of microparticles: an evolving research tool for vascular biology. Semin Thromb Hemost. 2007;33(8):771–779. Doi: 10.1055/s-2007-1000369.Enjeti AK, Lincz LF, Seldon M. Detection and measurement of microparticles: an evolving research tool for vascular biology. Semin Thromb Hemost. 2007;33(8):771–779. Doi: 10.1055/s-2007-1000369.Storey R, Judge H, Heptinstall S. Inhibition of ADP-induced P-selectin expression and platelet-leukocyte conjugate formation by clopidogrel and the P2Y12 receptor antagonist AR-C69931MX but not aspirin. Thromb. Haemost. 2002; 88(3):488–494. Doi: 10.1055/s-0037-1613242.Storey R, Judge H, Heptinstall S. Inhibition of ADP-induced P-selectin expression and platelet-leukocyte conjugate formation by clopidogrel and the P2Y12 receptor antagonist AR-C69931MX but not aspirin. Thromb. Haemost. 2002; 88(3):488–494. Doi: 10.1055/s-0037-1613242.Guyatt GH, Akl EA, Crowther M et al. Executive Summary: Antithrombotic Therapy and Prevention of Thrombosis, 9th ed: American College of Chest Physicians Evidence-Based Clinical Practice Guidelines. Chest. 2012;141:7S–47S. Doi: 10.1378/chest.141.4.1129a.Guyatt GH, Akl EA, Crowther M et al. Executive Summary: Antithrombotic Therapy and Prevention of Thrombosis, 9th ed: American College of Chest Physicians Evidence-Based Clinical Practice Guidelines. Chest. 2012;141:7S–47S. Doi: 10.1378/chest.141.4.1129a.Abdelhamid MF, Davies RS, Adam DJ, Vohra RK, Bradbury AW. Changes in thrombin generation, fibrinolysis, platelet and endothelial cell activity, and inflammation following endovascular abdominal aortic aneurysm repair. J Vasc Surg. 2012;55(1):41–46. Doi: 10.1016/j.jvs.2011.07.094.Abdelhamid MF, Davies RS, Adam DJ, Vohra RK, Bradbury AW. Changes in thrombin generation, fibrinolysis, platelet and endothelial cell activity, and inflammation following endovascular abdominal aortic aneurysm repair. J Vasc Surg. 2012;55(1):41–46. Doi: 10.1016/j.jvs.2011.07.094.Bradbury A, Adam D, Garrioch M, Brittenden J, Gillies T, Ruckley CV. Changes in platelet count, coagulation and fibrinogen associated with elective repair of asymptomatic abdominal aortic aneurysm and aortic reconstruction for occlusive disease. Eur J Vasc Endovasc Surg. 1997;13(4):375–380. Doi: 10.1016/s1078-5884(97)80079-2.Bradbury A, Adam D, Garrioch M, Brittenden J, Gillies T, Ruckley CV. Changes in platelet count, coagulation and fibrinogen associated with elective repair of asymptomatic abdominal aortic aneurysm and aortic reconstruction for occlusive disease. Eur J Vasc Endovasc Surg. 1997;13(4):375–380. Doi: 10.1016/s1078-5884(97)80079-2.Graff J, Klinkhardt U, Schini-Kerth VB, Harder S, Franz N, Bassus S, Kirchmaier CM. Close relationship between the platelet activation marker CD62 and the granular release of platelet-derived growth factor. J Pharmacol Exp Ther. 2002 Mar;300(3):952–957. Doi: 10.1124/jpet.300.3.952.Graff J, Klinkhardt U, Schini-Kerth VB, Harder S, Franz N, Bassus S, Kirchmaier CM. Close relationship between the platelet activation marker CD62 and the granular release of platelet-derived growth factor. J Pharmacol Exp Ther. 2002 Mar;300(3):952–957. Doi: 10.1124/jpet.300.3.952.Semenov AV, Romanov YA, Loktionova SA, Tikhomirov OY, Khachikian MV, Vasil’ev SA, Mazurov AV. Production of soluble P-selectin by platelets and endothelial cells. Biochemistry (Mosc). 1999;64(11):1326–1335.Semenov AV, Romanov YA, Loktionova SA, Tikhomirov OY, Khachikian MV, Vasil’ev SA, Mazurov AV. Production of soluble P-selectin by platelets and endothelial cells. Biochemistry (Mosc). 1999;64(11):1326–1335.Arnaoutoglou E, Kouvelos G, Papa N, Karamoutsios A, Bouris V, Vartholomatos G, Matsagkas M. Platelet activation after endovascular repair of abdominal aortic aneurysm. Vascular. 2016;24(3):287–294. Doi: 10.1177/1708538115596911.Arnaoutoglou E, Kouvelos G, Papa N, Karamoutsios A, Bouris V, Vartholomatos G, Matsagkas M. Platelet activation after endovascular repair of abdominal aortic aneurysm. Vascular. 2016;24(3):287–294. Doi: 10.1177/1708538115596911.Davì G, Romano M, Mezzetti A, Procopio A, Iacobelli S, Antidormi T, Bucciarelli T, Alessandrini P, Cuccurullo F, Bittolo Bon G. Increased Levels of Soluble P-Selectin in hypercholesterolemic patients. Circulation. 1998;97:953–957. Doi: 10.1161/01.cir.97.10.953.Davì G, Romano M, Mezzetti A, Procopio A, Iacobelli S, Antidormi T, Bucciarelli T, Alessandrini P, Cuccurullo F, Bittolo Bon G. Increased Levels of Soluble P-Selectin in hypercholesterolemic patients. Circulation. 1998;97:953–957. Doi: 10.1161/01.cir.97.10.953.Heemskerk JW, Mattheij NJ, Cosemans JM. Plateletbased coagulation: different populations, different functions. J Thromb Haemost. 2013;11(1):2–16. Doi: 10.1111/jth.12045.Heemskerk JW, Mattheij NJ, Cosemans JM. Plateletbased coagulation: different populations, different functions. J Thromb Haemost. 2013;11(1):2–16. Doi: 10.1111/jth.12045.Shattil SJ, Kim C, Ginsberg MH. The final steps of integrin activation: the end game. Nat Rev Mol Cell Biol. 2010;11:288–300. Doi: 10.1038/nrm2871.Shattil SJ, Kim C, Ginsberg MH. The final steps of integrin activation: the end game. Nat Rev Mol Cell Biol. 2010;11:288–300. Doi: 10.1038/nrm2871.Hannawa KK, Cho BS, Sinha I, Roelofs KJ, Myers DD, Wakefield TJ, Stanley JC, Henke PK, Upchurch GR Jr. Attenuation of experimental aortic aneurysm formation in P-selectin knockout mice. Ann N Y Acad Sci. 2006;1085:353–359. Doi: 10.1196/annals.1383.014.Hannawa KK, Cho BS, Sinha I, Roelofs KJ, Myers DD, Wakefield TJ, Stanley JC, Henke PK, Upchurch GR Jr. Attenuation of experimental aortic aneurysm formation in P-selectin knockout mice. Ann N Y Acad Sci. 2006;1085:353–359. Doi: 10.1196/annals.1383.014.Makin AJ, Blann AD, Chung NA, Silverman SH, Lip GYH. Assessment of endothelial damage in atherosclerotic vascular disease by quantification of circulating endothelial cells: Relationship with von Willebrand factor and tissue factor. European Heart Journal. 2004;25(5):371–376. Doi: 10.1016/j.ehj.2003.04.001.Makin AJ, Blann AD, Chung NA, Silverman SH, Lip GYH. Assessment of endothelial damage in atherosclerotic vascular disease by quantification of circulating endothelial cells: Relationship with von Willebrand factor and tissue factor. European Heart Journal. 2004;25(5):371–376. Doi: 10.1016/j.ehj.2003.04.001.Yokoyama S, Ikeda H, Haramaki N, Yasukawa H, Murohara T, Imaizumi T. Platelet P-selectin plays an important role in arterial thrombogenesis by forming large stable platelet-leukocyte aggregates. J Am Coll Cardiol. 2005;45(8):1280–1286. Doi: 10.1016/j.jacc.2004.12.071.Yokoyama S, Ikeda H, Haramaki N, Yasukawa H, Murohara T, Imaizumi T. Platelet P-selectin plays an important role in arterial thrombogenesis by forming large stable platelet-leukocyte aggregates. J Am Coll Cardiol. 2005;45(8):1280–1286. Doi: 10.1016/j.jacc.2004.12.071.Министерство Здравоохранения РФ. Национальные рекомендации по ведению пациентов с аневризмами брюшной аорты. 2016.Министерство Здравоохранения РФ. Национальные рекомендации по ведению пациентов с аневризмами брюшной аорты. 2016.Ailawadi G, Eliason JL, Upchurch GR Jr. Current concepts in the pathogenesis of abdominal aortic aneurysm. Eur. J Vasc Endovasc Surg. 2003;38(3):584–588. Doi: 10.1016/ s0741-5214(03)00324-0.Ailawadi G, Eliason JL, Upchurch GR Jr. Current concepts in the pathogenesis of abdominal aortic aneurysm. Eur. J Vasc Endovasc Surg. 2003;38(3):584–588. Doi: 10.1016/ s0741-5214(03)00324-0.Milne AA, Adam DJ, Murphy WG, Ruckley CV. Effects of asymptomatic abdominal aortic aneurysm on the soluble coagulation system, platelet count and platelet activation. Eur J Vasc Endovasc Surg. 1999;17(5):434–437. Doi: 10.1053/ ejvs.1998.0790.Milne AA, Adam DJ, Murphy WG, Ruckley CV. Effects of asymptomatic abdominal aortic aneurysm on the soluble coagulation system, platelet count and platelet activation. Eur J Vasc Endovasc Surg. 1999;17(5):434–437. Doi: 10.1053/ ejvs.1998.0790.Hannawa KK, Cho BS, Sinha I, Roelofs KJ, Myers DD, Wakefield TJ, Stanley JC, Henke PK, Upchurch GR Jr. Attenuation of experimental aortic aneurysm formation in P-selectin knockout mice. Ann N Y Acad Sci. 2006;1085:353–359. Doi: 10.1196/annals.1383.014.Hannawa KK, Cho BS, Sinha I, Roelofs KJ, Myers DD, Wakefield TJ, Stanley JC, Henke PK, Upchurch GR Jr. Attenuation of experimental aortic aneurysm formation in P-selectin knockout mice. Ann N Y Acad Sci. 2006;1085:353–359. Doi: 10.1196/annals.1383.014.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.