Моделирование фотодинамически-индуцированного тромбоза бедренной вены крыс

Цель работы – определение условий, обеспечивающих формирование стабильного тромба в бедренной вене крыс при фотодинамическом повреждении.

Материал и методы.Опыты проводились на крысах-самцах линии Вистар массой 250–270 г. Фотосенсибилизатор (ФС) Бенгальский розовый (ACROS ORGANICS, USA) (БР) вводили внутривенно в дозе 17 мг/кг и через 60 мин накладывали на бедренную вену сосудистый зажим. Дистальнее зажима проводили 30-минутное лазерное облучение вены (диодный лазер DPSS, Республика Южная Корея, 532 нм, 60 мВт, площадь облучения – 1 мм2 ). Зажим снимали через 90 мин после прекращения облучения. Кровоток регистрировали методом высокочастотной ультразвуковой допплерографии («Минимакс Допплер-К», Россия). Прекращение кровотока рассматривали как показатель тромбоокклюзии бедренной вены.

Результаты. У крыс после снятия зажима кровоток в облученных венах отсутствовал и через 24 ч не восстанавливался. Гистологически выявлено выраженное повреждение всех слоев сосудистой стенки и формирование тромба, заполняющего просвет сосуда. После 30-минутного облучения без пережатия вены кровоток сохранялся, хотя были выявлены повреждения сосудистой стенки. Введение БР и клипирование сосуда без облучения вызывало минимальные повреждения сосудистой стенки и не приводило к тромбозу.

Заключение. Для тромбообразования в бедренной вене крыс при фотодинамическом воздействии необходимо дополнительное временное прекращение кровотока в облучаемом сосуде. Сочетание фотодинамического повреждения сосуда и стаза обеспечивает надежную воспроизводимость тромбоза бедренной вены.

1. Watson BD, Dalton W, Busto R, et al. induction of reproducible brain Infarction by photochemically initiated thrombosis. Ann Neurol. 1985;17(5):497–504. Doi: 10.1002/ ana.410170513.

2. Белый Ю. А., Терещенко А. В., Шацких А. В. и др. Экспериментальное обоснование фотоиндуцированной модели тромбоза ветви центральной вены сетчатки // Офтальмохирургия. – 2011. – № 4. – С. 54–58. [Belyj YuA, Tereshchenko AV, SHatskih AV i dr. Eksperimental’noe obosnovanie fotoindutsirovannoj modeli tromboza vetvi tsentral’noj veny setchatki. Oftal’mohirurgiya. 2011;(4):54–58.

3. Chen W, Wu Y, Zheng M et al. Establishing an experimental rat model of photodynamically-induced retinal vein occlu sion using erythrosin B. 2014;7(2):232–238. Doi: 10.3980/j. issn.2222-3959.2014.02.08.

4. Arroyo JG, Dastgheib K, Hatchell DL. Antithrombotic effect of ticlopidine in an experimental model of retinal vein occlusion. Jpn J Ophthalmol. 2001;45(4):359–362. Doi: 10.1016/S0021-5155(01)00337-9.

5. Модель экспериментального фототромбоза бедренной артерии крысы / Н. Н. Петрищев, Е. Ю. Васина, С. Г. Чефу, М. М. Шамцян // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. – 2009. – Т. 8, № 1. – С. 42–45. [Petrishchev NN, Vasina EYu, CHefu SG, SHamcyan MM. Model’ ehksperimental’nogo fototromboza bedrennoj arterii krysy. Regionarnoe krovoobrashchenie i mikrocirkulyaciya. 2009;8(1):42–45. (In Russ.)].

6. Влияние препарата Нотромбел на процесс фотоиндуцированного тромбообразования / Е. Ю. Васина, С. Г. Чефу, Н. Н. Петрищев, О. С. Веселкина // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. – 2017. – Т. 16, № 3. – С. 70–75. [Vasina EYu, CHefu SG, Petrishchev NN, Veselkina OS. Vliyanie preparata Notrombel na protsess fotoindutsirovannogo tromboobrazovaniya. Regionarnoe krovoobrashchenie i mikrotsirkulyatsiya. 2017;16(3):70–75. (In Russ.)]. Doi: 10.24884/1682-6655-2017-16-3-70-75.

7. Matsuno H, Uematsu T, Nagashima S, Nakashima M. Photochemically Induced Thrombosis Model in Rat Femoral Artery and Evaluation of Effects of Heparin and Tissue-Type Plasminogen Activator With Use of This Model. J f Pharmacological Methods. 1991;25:303–318. Doi: 10.1016/0160-5402 (91)90030-9.

8. Matsuno H, Uematsu T, Umemura K, takguchi Y et al. A simple and reproducible cerebral thrombosis model in rats induced by a photochemical reaction and the effect of a plasminogen – plasminogen activator chimera in this model. JPM. 1993;29(3):165–173. Doi:10.1016/1056-8719(93)90068-P.

9. Kim Y, Nakase H, Nagata K et al. Observation of arterial and venous thrombus formation by scanning and transmission electron microscopy. Acta Neurochir. 2004;146(1):45–51. Doi: 10.1007/s00701-003-0156-5.

10. Белозерцева И. В., Драволина О. А., Тур М. А. Руководство по использованию лабораторных животных для научных и учебных целей в ПСПбГМУ им. акад. И. П. Павлова / под ред. Э. Э. Звартау. – СПб.: СПбГМУ, 2014. – 80 с. [Rukovodstvo po ispol’zovaniyu laboratornyh zhivotnyh dlya nauchnyh i uchebnyh celej v PSPbGMU im. akad. I. P. Pavlova / Belozerceva I.V., Dravolina O.A., Tur M.A.; pod red. EH. EH. Zvartau. SPb, izd-vo SPbGMU, 2014; 80 s.

11. Васина Л. В., Власов Т. Д., Петрищев Н. Н. Функциональная гетерогенность эндотелия // Артериальная гипертензия. 2017. – Т. 23, № 2. – С. 89–102. [Vasina LV, Vlasov TD, Petrishchev NN. Funktsional’naya geterogennost’ endoteliya. Arterial’naya gipertenziya. 2017;23(2):89–102. Doi: 10.18705/1607-419X-2017-23-2-88-102.

12. Petrishchev NN, Mikhailova IA. Thrombi formation parameters in mesenteric arterioles and venules in rats. Thromb. Res. 1993;72(4):347–352. Doi: 10.1016/0049-3848 (93)90144-D.